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MiR-106a-5p靶向E2F3和SP-1抑制C2C12細胞成肌分化的研究

朱由波; 孫世鐸 西北農林科技大學動物科技學院; 陜西楊凌712100

關鍵詞:c2c12細胞 成肌分化 e2f3 

摘要:為探究miR-106a-5p對成肌分化的作用及潛在調控靶點,在線預測miR-106a-5p潛在靶基因,通過RT-qPCR及Westernblot檢測miR-106a-5p對靶基因的調控作用,利用雙熒光素酶報告系統驗證miR-106a-5p與靶基因之間的互作,并以C2C12細胞系為實驗模型,采用過表達技術,在細胞形態學水平初步探索其對成肌分化的作用。在線預測發現E2F3和SP-1可能是miR-106a-5p的潛在靶基因;RT-qPCR分析表明,miR-106a-5p與E2F3和SP-1的表達模式相反;Westernblots結果發現,miR-106a-5p抑制E2F3和SP-1蛋白翻譯;雙熒光素酶報告載體系統表明,E2F3和SP-1是miR-106a-5p調控成肌分化的靶基因;此外,超表達miR-106a-5p抑制C2C12細胞分化,肌管數目顯著減少。結果表明,E2F3和SP-1是miR-106a-5p抑制C2C12細胞成肌分化的靶基因。

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