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穿膜肽TAT和R9的生物學效應的體內體外研究
關鍵詞：細胞穿膜肽 穿膜效率 活體穿膜
摘要：本文比較了兩種常用穿膜肽TAT和R9的體外穿膜效率、對細胞影響以及小鼠活體內不同器官的穿膜效率。非特異性穿膜肽TAT和R9分別為11個氨基酸和9個氨基酸的短肽,能夠有效地穿過細胞膜進入細胞。本研究純化制備出融合蛋白TAT-EGFP及R9-EGFP多肽,用相同濃度的活性TAT-EGFP和R9-EGFP處理肺癌細胞,觀察比較二者的穿膜活性及效率;設置不同濃度梯度檢測兩種穿膜肽是否對細胞產生影響;通過小鼠腹腔注射TAT-EGFP和R9-EGFP活性肽段,研究二者在活體能夠穿膜到達的靶位置,并比較分析二者穿膜的效果器官分布。結果顯示制備獲得的兩種融合蛋白TAT-EGFP和R9-EGFP均能有效穿過實現穿膜功能,兩種穿膜肽對乳腺癌細胞影響較小。活體試驗證明兩種穿膜肽在心、肝、脾、肺、腎器官均有分布,R9主要富集在小鼠的腎和肝臟中,TAT在6種被研究的器官都有富集,兩種細胞穿膜肽都能透過血腦屏障到達腦部。相對來說,TAT在小鼠活體中的穿膜效果更好,熒光富集多,R9整體穿膜效果較弱。本研究分析比較了兩種穿膜肽的細胞安全性濃度和活體的穿膜能力,為TAT和R9兩種穿膜肽在后續試驗中的合理有效的選擇和使用,提供了基礎數據和指導性依據。
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