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適用于Nimble Cloning系統(tǒng)的pCambia載體改造

曾妍靜; 沈文濤; 庹德財; 黎小瑛; 言普; 周鵬 海南大學(xué)熱帶農(nóng)林學(xué)院; 中國海南海口570228; 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所; 中國海南海口571101

關(guān)鍵詞:分子克隆技術(shù) nimblecloning系統(tǒng) pcambia載體 突變 sfii酶切位點(diǎn) 

摘要:為了適用于NimbleCloning這種新型的DNA分子克隆技術(shù),本研究以pCambia1304載體作為改造對象,采用突變堿基的方式去除載體中的5個SfiI酶切位點(diǎn),并且對改造后的載體在農(nóng)桿菌中的穩(wěn)定性以及在植物中的表達(dá)進(jìn)行分析,結(jié)果表明5個SfiI位點(diǎn)突變對載體的穩(wěn)定性和表達(dá)沒有影響。本研究為NimbleCloning系統(tǒng)提供了配套載體,也為其他pCambia系列載體改造成NimbleCloning系統(tǒng)載體提供了模板和參考。

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