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響應面法優化重組大腸桿菌產谷氨酸脫氫酶培養基的研究
關鍵詞：谷氨酸脫氫酶 響應面分析 培養基優化
摘要：通過響應面實驗設計方法對重組大腸桿菌的發酵培養基進行優化,提高胺化還原反應工藝制備L-草銨膦中關鍵生物催化劑谷氨酸脫氫酶的生產能力。首先通過單因素實驗篩選發酵培養基最適的碳源、氮源,并用Plackett-Burman設計確定發酵培養基各成分對產酶的影響程度。然后根據Box-Bohnken的中心組合設計實驗和響應面分析確定最佳的培養基成分組合。優化后的培養基組成為:甘油11.3g/L,安琪酵母粉90516.28g/L,MgSO4·7H2O0.63g/L,Na2HPO4·12H2O17.1g/L,KH2PO43g/L,NH4Cl1.5g/L,NaCl0.5g/L。采用優化后發酵培養基獲得的谷氨酸脫氫酶對2-羰基-4-(羥基甲基膦酰基)丁酸(PPO)的催化活力為129.1U/mL,是LB培養基的2.58倍,顯著降低了酶催化劑的制備成本。
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