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樹鼩大腦皮層少突膠質前體細胞的分離鑒定
李明學; 黎曉慧; 黃鑫; 王璇; 張志成; 袁園; 陸彩霞; 孫曉梅 中國醫學科學院/北京協和醫學院醫學生物學研究所樹鼩種質資源中心; 昆明650118; 昆明醫科大學; 昆明650500
關鍵詞：大腦皮層 原代細胞培養 分離純化 樹鼩
摘要：目的建立樹鼩大腦皮層少突膠質前體細胞(OPCs)的體外分離、原代培養方法,以及鑒定技術。方法新生48 h內給樹鼩施行安死術后采集大腦,去除腦膜和腦干,留下大腦皮層,然后使用胰酶和DNase I聯合消化大腦皮層,分離細胞原代培養。通過采用化學分離法和差速貼壁法從原代培養中獲得較為純化的OPCs。對純化和定向分化的細胞分別進行硫酸軟骨素蛋白多糖4(NG2)、髓鞘堿性蛋白(MBP)細胞免疫熒光染色鑒定。結果純化后的OPCs,胞體圓形或橢圓形,折光性強,有兩極或三極突起,經NG2細胞免疫熒光染色,細胞純度達97%左右。加入分化培養液后,OPCs可分化發育成熟,經MBP細胞免疫熒光染色為陽性。結論成功建立了樹鼩大腦皮層OPCs的體外分離純化培養方法。
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