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CHAC1基因沉默SU-DHL-8細胞株的構建及其對青蒿素細胞毒活性的影響
關鍵詞：彌散性大b細胞淋巴瘤 青蒿素 chac1 轉染 基因沉默
摘要：應用慢病毒短發夾RNA(short hairpin RNA,shRNA)轉染的方式構建了陽離子轉運蛋白樣蛋白1(cation transport regulator-like protein 1,CHAC1)基因沉默SU-DHL-8細胞株模型,用于研究CHAC1基因對青蒿素細胞毒活性的影響.研究了青蒿素對彌散性大B細胞淋巴瘤SU-DHL-8細胞增殖的抑制作用及作用后CHAC 1基因及蛋白的表達情況.應用小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默SU-DHL-8細胞株內的CHAC1基因.采用慢病毒轉染的方法構建CHAC1基因沉默的SU-DHL-8細胞株.采用實時熒光定量核酸擴增檢測系統(real-time quantitative PCR detecting system,qPCR)、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)活性測定法和蛋白免疫印跡(Westen blot)的方法檢測沉默效果以及CHAC1基因對青蒿素細胞毒活性的影響.成功構建了穩定沉默CHAC1基因的穩轉細胞株,并初步探討了CHAC1基因對青蒿素抑制彌散性大B細胞淋巴瘤SU-DHL-8細胞增殖的影響.
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