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云南不同地區蜘蛛蘭上朱頂紅褪綠環斑病毒RNAS序列分析

高君直; 吳保為; 高雪; 白繼龍; 李文貴; 飛進強; 劉雅婷; 李永忠 云南農業大學農學與生物技術學院; 云南昆明650201; 云南紅河綠春縣農業技術推廣中心; 云南紅河662599; 云南高原特色農業產業研究院; 云南昆明650201

關鍵詞:蜘蛛蘭 番茄斑萎病毒屬 朱頂紅褪綠環斑病毒 突變 重組 

摘要:朱頂紅褪綠環斑病毒(Hippeastrum chlorotic ringspot virus,HCRV)是2013年首次發現并報道的番茄斑萎病毒屬(Tospovirus)的新種,該病毒可引起蜘蛛蘭產生同心環紋、葉片畸形、壞死斑等癥狀。本研究從云南省不同地區選出6份HCRV單獨侵染的蜘蛛蘭樣本,通過RT-PCR、克隆、轉化、測序和拼接,獲得6份樣本的HCRV分離物RNAS序列。6個分離物S序列長度在2714~2747nt之間,其上編碼的非結構蛋白NSs(Nonstructural protein by the SRNA)的NSs基因是1332nt,編碼N(Nucleocapsid)蛋白的N基因是825nt。通過生物信息學分析,確定了不同HCRV株系間的關系。同時對SRNA序列及其所編碼的非結構蛋白NSs及核殼體蛋白N進行突變和重組分析,確定這6個HCRV分離物的RNAS序列均存在突變和重組事件。結合6個分離物采集地的環境信息,可以看出氣候類型、溫度等環境差異很大,因此推測云南省多樣的氣候類型跟HCRV在云南省的廣泛分布有關,在這6個HCRV分離物中檢測到的快速突變和重組可能是導致HCRV快速適應不同環境,分布范圍廣泛的原因之一。最后,通過系統進化分析,推測采集自云南省保山市的HLS—TCRH是6個HCRV分離物中最先開始進化的,由它分為兩個進化支,一支包括玉溪的YN—YX—HT-1和德宏瑞麗的HLS—YNRL-1,另一支包括昆明的HLS—YL,紅河的HLS—HHXY以及臨滄的HLS—LC—YLHW。

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