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黃熱病毒可視化RT-LAMP檢測方法的建立
鄭夔; 戴俊; 劉麗娟; 袁帥; 孫芳芳; 黃吉城 廣東檢驗檢疫技術中心; 廣東廣州510700; 中國檢驗檢疫科學研究院
關鍵詞：黃熱病毒 環介導等溫擴增 等溫擴增
摘要：目的建立一種根據顏色變化判斷結果的黃熱病毒可視化RT-LAMP快速核酸檢測方法。方法針對112株目前GeneBank上所有基因亞型黃熱病毒株的5’端非編碼區保守性核苷酸序列,設計黃熱病毒特異性LAMP引物,建立黃熱病毒可視化RT-LAMP檢測方法。評價該方法的特異性、靈敏性,并用臨床樣本和模擬樣本進行應用性驗證。結果建立的RT-LAMP方法有較高的特異性,與登革病毒、裂谷熱病毒、西尼羅病毒、乙腦病毒及基孔肯雅病毒無交叉反應;用體外轉錄的RNA模板評估,其靈敏性可達102拷貝/μl;用口岸發熱病例血清樣本驗證,該方法可檢出血清中的黃熱病毒。結論建立的黃熱病毒可視化RT-LAMP檢測方法操作簡便、快速、特異性好,可應用于黃熱病毒的現場檢測。
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