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雞源SUMO標簽蛋白的鑒定及在IBDV VP2原核表達中的促溶功能
關鍵詞：雞源sumo蛋白 ibdv vp2 標簽蛋白 融合表達
摘要：VP2蛋白是傳染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的保護性抗原。原核表達中能否獲得具有天然構象的可溶性VP2蛋白是研發IBD亞單位疫苗的關鍵問題。為了解是否存在雞自體促溶標簽蛋白以及外源促溶標簽能否在一定程度上促進蛋白的正確折疊,試驗對不同物種來源的類泛素蛋白修飾分子(small ubiquitin-like modifier,SUMO)進行比對研究。結果顯示,獲取到的3種雞源SUMO蛋白與酵母源SUMO蛋白的氨基酸同源性均高于40%,其中SUMO-1與SUMO-3兩種蛋白可以在大腸桿菌中可溶性表達;通過SUMO-1、SUMO-3與VP2蛋白的融合表達,證明了雞源SUMO蛋白對VP2具有促溶效果,得到的重組菌株P-28A-s1-VP2和P-28A-Os3-VP2瓊脂擴散效價均達到1∶16;經過純化后,融合蛋白SUMO-1-VP2的瓊脂擴散效價可達到1∶256;使用SUMO蛋白酶酶切融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot結果表明雞源SUMO蛋白可以被成功切割,說明試驗發現的雞源SUMO蛋白可以作為促溶標簽,在亞單位疫苗關鍵抗原表達中具有廣闊的應用前景。
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