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雙氫青蒿素對肝癌細胞氨基酸代謝的影響及機制研究
關鍵詞：雙氫青蒿素 肝癌 機制 代謝通路 氨基酸
摘要：目的:考察雙氫青蒿素(DHA)對人肝癌細胞Huh7、BEL-7402中氨基酸類代謝產物的影響,為闡明DHA參與肝癌細胞代謝的調控機制提供理論基礎。方法:采用CCK-8法,測定不同濃度DHA(12.5、25、50、100μmol/L)作用24、48、72 h后對兩種細胞活性的影響。將兩種細胞分別分為對照組和給藥組(DHA,25μmol/L),加入不含藥或含藥培養基后培養24 h,均平行操作3份。對各組細胞樣品進行衍生化處理后,采用氣相色譜聯用質譜(GC-MS)法檢測細胞中氨基酸代謝物含量變化,結合SIMCA-P軟件分析和化合物譜庫的比對,篩選出兩種細胞中的差異代謝物;采用Metaboanalyst 4.0軟件對差異代謝物進行通路富集分析。結果:與對照組比較,給藥組Huh7細胞或BEL-7402細胞中谷氨酰胺、谷胱甘肽、苯丙氨酸、富馬酸、牛磺酸等含量均呈下降趨勢。上述兩種細胞中分別篩選獲得28、29個差異代謝物,兩者的共同差異代謝物有10個,包括谷氨酰胺、谷胱甘肽、牛磺酸、富馬酸、苯丙氨酸等;兩者的差異代謝物分別富集到8、6條通路上,其共同富集通路為氨基酸-tRNA生物合成、天冬氨酸-丙氨酸-谷氨酸代謝、氮代謝、苯丙氨酸代謝、戊糖磷酸途徑。結論:DHA能明顯降低Huh7細胞和BEL-7402細胞的活性,并能顯著降低細胞中谷氨酰胺、谷氨酸、谷胱甘肽、苯丙氨酸等的含量;其可能通過影響天冬氨酸-丙氨酸-谷氨酸代謝通路等機制來調控兩種細胞的生長。
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