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SiRNA干擾靶向抑制酪氨酸蛋白激酶Lck對哮喘小鼠T細胞功能的影響
關鍵詞：rna 小分子干擾
摘要：目的通過siRNA技術靶向抑制哮喘小鼠T細胞非受體酪氨酸蛋白激酶Lck的基因表達，研究Lck特異性siRNA對哮喘小鼠T細胞功能的影響。方法化學法合成小鼠T細胞Lck基因21—23bp的RN段，以INTERFERinTMsiRNA Transfection Reagent作為轉染試劑，將合成的siRN段轉染哮喘小鼠脾臟來源的T細胞，作用48h后再與哮喘小鼠骨髓來源的樹突狀細胞（DC）混合反應48h，收集細胞上清液，ELISA法檢測細胞因子IL4、IL-13、IL-2、INF-1；Western Blot法檢測T細胞Lck蛋白的含量，判斷其表達是否被沉默。結果siRNA干擾組T細胞中幾乎檢測不到Lck蛋白的表達，且其細胞上清液中IL-4、IL-13的水平（10．19±1．66、12．34±0．79）較非siRNA干擾組（28．06±2．88、27．87±1．61）及對照組（22．07±2．51、20．47±2．37）明顯下降，差異有統計學意義（P〈0．01）。結論特定的21—23bp的RN段能夠以siRNA干擾的方式有效的抑制特定基因的表達，Lck特異性siRNA可以阻斷哮喘小鼠T細胞的激活和分化，減少哮喘炎癥因子的釋放。
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