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聚乳酸-羥基乙酸編織網(wǎng)/膠原-殼聚糖多孔支架促血管化研究

王新剛; 韓春茂; 有傳剛; 鄭玉蓉; 李齊寅; 張莉萍 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院燒傷科; 杭州310009

關(guān)鍵詞:組織工程 膠原 殼聚糖 血管化 機(jī)械強(qiáng)度 

摘要:目的觀察聚乳酸.羥基乙酸(PLGA)編織網(wǎng)/膠原-殼聚糖多孔支架(PCCS)對血管化的影響,探討其相關(guān)機(jī)制。方法(1)采用冷凍-凍干法制備PCCS和膠原-殼聚糖支架(CCS),對比觀察PCCS、PLGA編織網(wǎng)及CCS的微觀形態(tài)及吸水能力。(2)取PCCS與CCS樣本,分別植入24只SD大鼠脊柱兩側(cè)皮下,按照隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分成3批,于術(shù)后1、2、4周分批處死大鼠,采集埋植部位皮膚標(biāo)本,行組織病理學(xué)、免疫組織化學(xué)檢測;采用實(shí)時(shí)定最RT—PCR檢測其α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)與血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的mRNA表達(dá)水平。對數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。結(jié)果(1)PLGA編織網(wǎng)與膠原-殼聚糖海綿緊密結(jié)合,形成的PCCS具有與CCS相類似的三維多孔結(jié)構(gòu)。(2)PCCS的吸水率為(506±15)%,顯著高于PLGA編織網(wǎng)的(195±15)%,明顯低于CCS的(627±21)%,t值分別為11.9、3.8.P〈0.05或P〈0.001。(3)CCS4周左右完成支架全層的組織長人,PCCS僅用2周完成這一過程且形成的新生膠原更加豐富、分布均勻。(4)隨著埋植時(shí)間的延長,2種支架的血管逐漸由支架劇圍向支架內(nèi)部長人。術(shù)后1、2、4周,PCCS中血管計(jì)數(shù)依次為(10.7±3.2)、(18.6±2.1)、(30.3±4.5)條/mm2,明昆高于CCS的(5.4±0.9)、(10.8±4.2)、(23.6±1.7)條/mm2,t值分別為4.6、4.4和4.5,P值均小于0.01。(5)術(shù)后各時(shí)相點(diǎn)PCCS中α-SMA與VEGF的mRNA表達(dá)水平均高于CCS(t值分別為1.26、1.63、2.17與5.52、2.07、1.78,P值均小于0.01)。結(jié)論P(yáng)CCS能夠快速誘導(dǎo)血管長入并促進(jìn)血管成熟,其中支架的機(jī)械支撐作用與三維多孔結(jié)構(gòu)具有重要協(xié)同作用。

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