關鍵詞:甲狀旁腺素 纖溶酶原激活物抑制物1 細胞外信號調節map激酶類 人近曲小管上皮細胞
摘要:目的從體外觀察ERK信號通路在甲狀旁腺激素(PTH)致人近曲小管上皮細胞(HK-2)合成纖溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)中的作用。方法以HK-2細胞株為研究對象,用不同濃度FFH(10^8、10^9、10^10、10^11、10^12mol/L)作用細胞48h,以及10-10mol/LPTH作用細胞不同時間(12、24、36、48、72h),分別用RT—PCR法檢測PAI-1mRNA表達,Western印跡法檢測PAI-1蛋白表達。以10^10mol/LFFH作用細胞48h,分別觀察細胞ERK1/2抑制劑預處理前后磷酸化(P)ERK1/2、PAI—1mRNA及蛋白的變化情況。結果10。zmol/LPTH可促進細胞在基因及蛋白水平合成PAI-1,隨著PTH濃度逐漸上升,PAI—1mRNA及蛋白濃度均相應增加,以10^10mol/LFFH組刺激作用最顯著,分別為對照組的4.01倍和3.81倍(均P〈0.01)。但隨著PTH濃度進一步增加,PAI.1mRNA及蛋白濃度卻隨之下降。10。omol/LPTH作用細胞,12h時有少量PAI-1表達,72h時達峰值,并呈時間依賴性,分別為0h組的4.06倍和4.03倍(均P〈0.01)。10^10mol/LPTH作用細胞48h,有大量的p-ERK1/2合成(P〈0.01),經ERK1/2抑制劑預處理后,PAI-1及ERK均顯著下降(均P〈0.01),但仍高于對照組(均P〈0.05)。結論ERK信號通路部分參與PTH致HK-2細胞合成PAI-1的作用。
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