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細(xì)胞培養(yǎng)氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記-質(zhì)譜技術(shù)測(cè)定槲皮素對(duì)人肝癌細(xì)胞熱休克蛋白表達(dá)的影響
關(guān)鍵詞：槲皮素 hepg2細(xì)胞 熱休克蛋白
摘要：目的觀察槲皮素對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2中熱休克蛋白（HSP）發(fā)達(dá)的影響，為其抗腫瘤活性探尋可能的靶點(diǎn)。方法經(jīng)過連續(xù)傳代，充分氚化HepG2細(xì)胞中的亮氨酸，并鑒定其標(biāo)記率。采用四早基偶氮唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)槲皮素對(duì)HepG2細(xì)胞中的亮氨酸,并鑒定其標(biāo)記率。采用四早基偶氮唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)槲素對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制活性及有效濃度。以50μmol/L槲皮素作用氚化HepG2細(xì)胞45h后，與正常HepG2細(xì)胞按1：1等量混合電泳，提肽后時(shí)行質(zhì)譜鑒定，將獲得的肽片段數(shù)據(jù)進(jìn)行Mascot檢索。結(jié)論SILAC-MS成熟可靠，能全面定量分析外因作用前后HepG2細(xì)胞中全系列蛋白譜的變化，槲皮素對(duì)HepG2細(xì)胞中HSP表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑制能力，并且這種作用可能是其發(fā)揮腫瘤活性的途徑之一。
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