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番木瓜環斑病毒西瓜株系弱毒突變體的篩選與應用
關鍵詞：番木瓜環斑病毒 弱毒突變體 葫蘆科作物 交叉保護
摘要：為防治番木瓜環斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)在我國葫蘆科作物上引起的病毒病害,以PRSV西瓜株系山東分離物(PRSV-SD)侵染性cDNA克隆為基礎,采用定點突變方法將輔助成分-蛋白酶保守氨基酸137位和346位的天冬酰胺(N)和417位的纈氨酸(V)突變為丙氨酸(A),應用農桿菌浸潤法接種西葫蘆葉片并分析突變對PRSV-SD致病力的影響,篩選弱毒突變體,進而評價其交叉保護效果。結果表明,與野生型PRSV-SD相比,獲得的3個突變體N137A、N346A和V417A,接種后在西葫蘆植株上的癥狀明顯減輕,衣殼蛋白在葉片中的積累水平分別為野生型PRSV-SD的24.0%、13.0%和4.0%,均為弱毒突變體。當保護間隔期為10 d時,弱毒突變體N137A具有完全的交叉保護效果,N346A可延遲發病15 d,而V417A無交叉保護效果。當間隔保護期為15 d時,弱毒突變體N137A和N346A的保護效率分別為100.0%和26.7%,而V417A無交叉保護效果。
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